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2005-03-03 16:38:24 | Hit : 26449 | Vote : 8255

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Animal cell culture에서 CO2와 sodium bicarbonate역할 등

1. suspension cell의 경우 growth curve에 영향을 줄만한 요인은 무엇인가요??

우선 이것을 알아보시려면 standard growth curve를 cell농도별로 ELISA로 찍어보셨겠죠?
그래프는 S자커브를 그리면서 나타나게 됩니다.
그 중간정도인 흡광도 0.5~0.7사이의 세포농도로 seeding을 하는 것이 바람직합니다.
그런데 접종한 세포의 농도가 낮거나 높으면 예측할수 있는 기간별 증식속도를 알기가 힘듭니다.
그 이유는, 흡광도 0.5~0.7사이에서의 농도만 일차함수적인 증식만을 알수 있기때문입니다.
더 알기쉽게 말씀드리면, 농도가 낮거나 높을때의 흡광도차이는 미세하게 나타날 뿐만 아니라 일반적으로 로그스케일로 그래프를 나타내기때문에 예를 들어 흡광도가 0.1 정도를 나타내는 농도로 seeding을 하셨다면 그 x축인 세포의 농도를 로그스케일에 맞춰서 정확히 읽기가 힘들다는 것이죠.
하지만 0.5~0.7사이의 값에서는 흡광도 값에 비례해서 농도를 계산할 수 있습니다.
이건 animal cell culture라는 책에서 cell counting부분에 보시면 자세히 나와있습니다.

2. monolayer cell과 suspension cell culture사이의 가장 큰 차이점은 무엇일까여??

님께서 어떠한 세포를 배양하느냐에 따라 배양방법이 달라집니다.
세포들은 각각의 특성을 갖고 있습니다. 어떤세포는 treated petri-dish에서 바닥에 붙여서 배양해야 잘 자라는 세포가 있는 반면 어떤 세포는 부유시킨 상태에서 배양하는 것이 바람직한 것들도 있습니다.
세포의 종류에 따라 배양법이 다릅니다.

3. CO2 와 sodium bicarbonate 그리고 배지의 pH변화는 어떤 상관 관계가??? 화학식은 어떻게 되는지?

CO2는 세포의 배양에 있어서 필수적인 환경입니다. 보통은 CO2 5%의 환경에서 배양을 합니다. 이 상태에서 세포를 배양하면 보통 2~3일이면 배지가 산화되어 짙은 선분홍색을 띄게 됩니다.
그리고 sodium bicarbonate는 특별한 역할을 하는 것이 아니라, 배지의 산화정도에 따른 색을 변화를 뚜렷하게 보여주기위해 첨가하는 것입니다.
배지를 만드실때에 DMEM을 넣고 stirring만 해줄때랑 sodium bicarbonate를 2g넣었을때랑 색의 변화가 확연히 나는 것을 보실수 있을껍니다.
완성된 배지의 색은 약간 갈색을 띄는 빨강색(?)정도로 보이지만, 만들어 놓은지 오래된 배지의 색은 짙은 선분홍색을 띄는걸 보실수 있습니다.

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